发育中的H-Tx大鼠脑脊液组成的蛋白质组学研究

本小组先前的工作表明，来自E20和E21岁的受H-Tx影响的大鼠胎儿的脑脊液在培养中对皮质细胞增殖有抑制作用，但这种作用在正常脑脊液中没有发生。通过加热脑脊液可以消除抑制作用，这表明活性成分是一种蛋白质。

这些数据使我们使用蛋白质组学方法来研究脑脊液的蛋白质谱，并比较妊娠后期胎儿正常和受影响的脑脊液的蛋白质谱。我们比较了从E17-E21患病胎儿侧脑室采集的脑脊液与从相同年龄的正常动物大池采集的脑脊液。二维凝胶结果显示，不同年龄正常脑脊液与受累脑脊液差异有统计学意义。用MALDI-TOF质谱法鉴定了部分不同的蛋白质，并用液相色谱-质谱法对数据进行了验证。

有趣的成分，如卷轴前体、NGF前体、甲胎蛋白和载脂蛋白，无论从正常动物还是患病动物身上采集，都随着年龄的增长而变化。Reelin, NGF和甲胎蛋白都在皮质发育中起重要作用。正常动物的脑脊液中存在Reelin前体，但在E21和P0(出生之日)H-Tx胎儿中不存在。两个动物组中都有NGF，但在第21天H-Tx大鼠中数量减少。甲胎蛋白在两者中都存在，且含量相同。随着年龄的增长，正常胎儿和病胎的脑脊液中蛋白质的总量都在减少。

这些发现加强了脑脊液在正常脑发育和与早发性脑积水相关的异常发育中起重要作用的假设。

蛋白质组学为鉴定脑脊液蛋白提供了一种重要的方法，特别是在脑脊液量很少的情况下;所有其他方法需要更大的量，这是本研究的主要限制。LC-MS是一种新技术，可以在非常小的样品中鉴定大量蛋白质，这将有助于正常和异常发育中候选蛋白质的鉴定、纯化和分析。